MILCHTEST (тест для определения антибиотиков) «Packhaus Rockmann GmbH» /Германия/

Для определения остаточных количеств антибиотиков и сульфамидных веществ в молоке ООО «Галеан, Лтд» предлагает MILCHTEST производства «Packhaus Rockmann GmbH» /Германия/ . С 1974 года это признанный во всем мире стандарт для анализа остаточных количеств антибиотиков в молоке. Это ингибиторный тест, основанный на диффузии в среде агара бактерии Bacillus StearothermоphiIus c рН-индикацией. Наилучшие показатели анализа: широкий спектр определений, очень высокая чувствительность к пенициллиновым веществам, чувствительность к большому количеству антибиотиков и моющих веществ (29 антибиотиков и 11 ингибирующих веществ), репродуктивность и надежность, длительный срок годности, четкие результаты.

MILCHTEST может использоваться для исследования других (жидких) продуктов на наличие антибиотиков. Не возникает никаких проблем при тестировании: восстановленного молока, обезжиренного молока, молока, прошедшего тепловую обработку, сыворотки. Молоко от других видов животных (овец, коз, буйволиц), сливки, йогурт, шоколадное молоко, кремы и др., а также моча, сок сырого мяса, сыворотка крови, в принципе, могут тестироваться.

MILCHTEST стандартные диффузионные тесты для определения остаточных количеств антибиотиков и сульфамидных веществ в молоке

ВВЕДЕНИЕ

Лекарственное лечение молочного скота от различных заболеваний вызывает появление остаточных количеств медицинских препаратов в молоке в течение определенного периода времени, что крайне нежелательно как с точки зрения здравоохранения, так и по технологическим причинам, специфическим для молочной промышленности. Таким образом, имеется объективная необходимость в простой и надежной системе оценки молока как для молочной индустрии, так и для производителей молока, которые должны стремиться исключить попадание остатков лечебных препаратов в молоко. Исходя из этого, Компания «DSMFoodSpecialties» разработала стандартный тест для определения остаточных количеств антибиотиков и сульфамидных веществ в молоке, получивший патентованное название MILCHTEST и отличающийся исключительными преимуществами. MILCHTEST вошел в российский ГОСТ Р 51600-2000 "Молоко. Методы определения антибиотиков".

ОСНОВНЫЕ ПРЕИМУЩЕСТВА

1.  Надежность и точность.

2.  Очень высокая чувствительность к пенициллиновым веществам.

3.  Достаточно высокая чувствительность к большинству других антибактериальных веществ.

4.  Простота выполнения анализов и легкость определения их результатов.

5.  Длительный срок хранения.

ОБОРУДОВАНИЕ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ АМПУЛЬНЫХ ТЕСТОВ

Для инкубационной выдержки ампул (поддержания постоянной температуры) разработан оригинальный сухой нагреватель, работающий от сети переменного тока напряжением 220 В (имеются модификации сухого нагревателя с питанием 12 В постоянного тока, для использования в автоцистерне при перевозке молока), имеющий ряд серьезных эксплуатационных преимуществ перед стандартными водяными банями. Контроль температуры в полости нагрева ампул осуществляется электрическим термометром с дисплеем на жидких кристаллах. Контроль времени осуществляется электронным таймером с аналогичным дисплеем. Комплект для ампульного теста включает в себя также шприц и достаточное количество одноразовых пипеток для отбора проб объемом 0,1 мл.

СОСТАВ КОМПЛЕКТА ПРЕПАРАТОВ

В состав комплекта входят:

•  4 блока ампул (для модификации МИНИ - 1 блок) по 25 штук каждый, содержащих твердую фиолетовую агаровую среду, включающую стандартизованное количество спор Bacilus Stearotermophilus var. Calidolactis C953;

•  шприц-дозатор для отбора проб молока;

•  100 штук одноразовых пипеток (для МИНИ - 25) для отбора проб молока;

•  пинцет.

 

СУЩНОСТЬ МЕТОДА

•     Агаровая среда содержит стандартизованное количество спор микроорганизма Bacilus Stearotermophilus var. Calidolactis C953 Этот вид бактерий был выбран из-за их высокой чувствительности к большинству антибиотиков, и особенно пенициллина и других бета-лактамных веществ. При хранении в холодных условиях споры сохраняют свою жизнеспособность в течение многих месяцев.

•     При повышении температуры до 64 0С споры быстро размножаются, что приводит к образованию кислоты. Когда количество этой кислоты становится достаточным, происходит изменение цвета индикаторной среды с фиолетового на желтый.

•     Вместе с тем, если проба молока содержит ингибируюшие вещества, например остатки антибиотиков, то они будут диффундировать в агаровую среду и, когда их концентрация станет достаточно высокой, они задержат процесс размножения бактерий и, соответственно, образования кислоты. В этом случае цвет теста не изменится на желтый: он останется фиолетовым, если концентрация ингибитора выше предела обнаружения для этого ингибитора, и он будет иметь цвет между фиолетовым и желтым, если концентрация ингибитора близка к пределу обнаружения.

•           Поведение "рабочих" микроорганизмов, которое включает в себя размножение, развитие и образование кислоты, зависит от температуры выдержки. Как слишком высокая, так и слишком низкая температура вызывают замедление этих процессов, что приводит к увеличению длительности анализа. Отклонения от оптимальной температуры также могут влиять на чувствительность теста по отношению к определенным веществам.

ИССЛЕДОВАНИЯ ДРУГИХ ВИДОВ ПРОБ ПРОДУКТОВ

MILCHTEST может использоваться для исследования других (жидких) продуктов на наличие антибиотиков. Не возникает никаких проблем при тестировании:

•  восстановленного молока;

•  обезжиренного молока;

•  прошедших тепловую обработку молока;

•  сыворотки.

Молоко от других видов животных (овец, коз, буйволиц), сливки, йогурт, шоколадное молоко, кремы и др., а также моча, сок сырого мяса, сыворотка крови, в принципе, могут тестироваться, если такие препятствующие факторы, как жир, кислота или красители будут нейтрализованы.

ПРЕДЕЛЫ ОБНАРУЖЕНИЯ

Таблица показывает уровень определения антибиотиков (частицы на миллион, или ng/ml) в смешанном, сыром коровьем молоке при использовании метода Дельвотест® СП-ЭТ (Delvotest® SP-NT)

 

Антибиотики и ингибирующие вещества	Уровень определения антибиотиков во время проведения теста	Уровень определения антибиотиков после 3 часов
Группа К пактам
пенициллин	1-2	2-3
ампенициллин	4	6-7
амоксициллин	2-3	3-5
цефтифур	25-50	50-100
цефапирин	4-6	6-8
клоксациллин	20	20-30
диклоксациллин	10	10-20
оксациллин	10	10
сульфамиды
сульфадиазин	25-50	100-150
сульфаметазин	25-100	100-250
тетрациклин
тетрациклин	250-500	800
окситетрациклин	250-500	800
Микролиды
тилозин	30	50
спирамицин	400-600	800-1000
эритромицин	40-80	200
Другие
Триметоприм	50-100	200-300
дапзон	0,5-1	1-2,5
Аминоглицоциды
Гентамицин	50	200
Неомицин	100-200	300-600

 

Указанные выше показатели в таблице основаны на показаниях желтого/фиолетового до фиолетового цвета и являются индикативными. Положительный результат теста рекомендуется дополнительно подтвердить. Факторами, влияющими на результат теста, являются время инкубации, температура, условия хранения и человеческий фактор.

ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К МОЮШИМ И ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИМ ВЕЩЕСТВАМ

Вероятность получения ошибочной положительной реакции из-за возможного загрязнения пробы моющими или дезинфицирующими веществами может иметь место только в случае высокой концентрации этих веществ. Если же они применяются для мойки доильного оборудования и обработки вымени, то их конечная концентрация в молоке обычно слишком мала, чтобы повлиять на процедуру тестирования. Обычно MILCHTEST ингибируется такими веществами только при концентрации 0,1% (100 частей на млн.) или выше. Некоторые примеры приведены в таблице 2.

Таблица 2. Концентрации некоторых моющих и дезинфицирующих веществ, дающих положительный результат при тестировании

Активный хлор	200 частей на млн.
Иод	150 частей на млн.
Перекись водорода (30%)	600 частей на млм.
Цетримид (четвертичный бромид аммония)	100 частей на млн.
Фармкват (5% четвертичный хлорид аммония)	10000 частей на млн.
Родалон (четвертичный хлорид аммония)	30 частей на млн.
Нироклар (на основе фософрной кислоты)	500 частей на млн.
Калгонайт (5%дихлоро-изо-цианурат калия)	100 частей на млн.
Сублимат (ртутный хлорид)	10 частей на млн.
Дихромат калия	20 частей на млн.
Азид натрия	50 частей на млн.